1、常规的细胞冻存主要采用DMSO+血清的方式，尊龙凯时进行冻存液的无血清、低（无）DMSO、无蛋白这些方向持续开发的原因是什么？
细胞冻存液的研发历史可以追溯到20世纪中期，随着细胞生物学和低温生物学的发展，冻存液逐渐优化和改进。20世纪60年代，DMSO成为常用冷冻保护剂，广泛应用于细胞冻存。随后，冻存液中开始添加胎牛血清（FBS）等成分，提供营养和保护。20世纪80年代，科学家优化冻存液配方，调整DMSO和血清浓度，减少毒性并提高冻存效果。
DMSO作为常用的冷冻保护剂，在较高浓度或长时间暴露下会对细胞产生毒性，影响细胞活力和功能。因此降低其浓度或寻找替代品是必要的。
血清因其成分复杂、存在批次差异、成分不明确、存在病原体污染风险等原因，应用无血清冻存液已成为细胞冻存领域主流。
蛋白在冻存液中的添加可能为后续实验和监管引入不可控的变量，且高质量蛋白成本高，往往会提高冻存液的成本。
尊龙凯时自2018年推出第一款经典的无血清细胞冻存液以来，CRD系列无血清细胞冻存液因其过硬且稳定的产品质量，获得了国内数百家实验室和企业用户的认可，广泛服务于国内细胞生物学研究和应用。
2、应用CRD系列冻存液进行细胞冻存前需要注意什么？
由于各类动物细胞株（系）通常都比较脆弱，对所处的环境要求较高，而细胞冻存是让人工干预，强行让细胞处于一种缺营养的“冬眠”状态，所以冻存之前的细胞状态对冻存的效果非常关键，建议冻存之前，务必让细胞处于良好的对数期状态，冻存之前细胞存活率应接近或达到100%。对于贴壁细胞，冻存之前，胰酶消化要适度，吹散和重悬动作要适当，以免损伤细胞状态。过度消化或未轻柔吹打和重悬的细胞由于状况较差，通常不宜再冷冻保存。观察冻存前的细胞状态应该在消化重悬完成后进行，以确认冻存时的细胞状态良好。
3、应用尊龙凯时的CRD系列无血清细胞冻存液发现有的细胞冻存效果不好？有什么建议？
CRD系列无血清细胞冻存液主要依据成分的差异进行产品命名，均为通用型细胞冻存液，经过广泛测试验证，适用于绝大多数哺乳动物（包括人）原代细胞、传代细胞系以及杂交瘤细胞的冻存等。
因为细胞来源各异、种类繁多，并且新的细胞株（系）不停的涌现，甚至许多细胞都是经过工程化改造的细胞系，我们无法对市场上所有细胞株（系）进行全面验证。因此，对于某些较为珍贵的细胞，建议用户先进行短期（如一周以内）冻存效果预实验，或者同时使用传统含血清的常规冻存液进行对比测试，确认无误后再进行正式批量冻存。
4、冻存液瓶底出现沉淀，是不是产品质量出现问题？
冻存液中沉淀的出现一般存在如下三种情况：
（1）溶液配置、过滤分装过程中，异物的带入。尊龙凯时的无血清细胞冻存液的生产过程均严格按照GMP体系进行管理，尤其在产品质检和出库前会进行双重质检，在外观上能够杜绝此类现象的发生。这种情况，在我们的产品中罕见发生。
（2）溶液染菌。尊龙凯时无血清细胞冻存液生产过程中有一个非常重要的步骤是用0.22μm孔径滤膜进行除菌过滤，且整个操作过程是在百级的环境中进行操作。此外，我们会对每批终产品出厂前进行无菌检测，确保终产品没有染菌。
为避免客户在使用冻存液时，产生细菌污染，建议如下：
①在超净工作台或生物安全柜中进行操作，同时使用无菌的移液器、吸头和容器，操作前后用75%乙醇或消毒剂清洁双手。
②根据实验需要，可以将大包装冻存液分装成小份进行保存，减少反复开启瓶盖带来的污染风险；
（3）盐溶液析出
为保证达到更优的保护效果，CRD系列无血清细胞冻存液含有维持细胞状态良好的复合盐离子成分，因此，在低温保存一段时间后，瓶底可能会出现少量饱和析出的固体盐沉淀，经严格测试，对细胞冻存保护效果无任何不利影响，此时只需取用上清，正常使用即可，或者离心去除沉淀或者用过滤器（0.22μm孔径滤膜）过滤去除少许沉淀。一般饱和析出不会发生第二次。
若您在使用尊龙凯时CRD系列无血清细胞冻存液过程中遇到任何问题，欢迎随时与我们联系。
